布氏菌病抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
包装规格
96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
原理及用途
本试剂盒由预包被布氏菌抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测动物血清、血浆样本中布氏菌抗体。可用于布氏菌疫苗免疫效果评价及辅助诊断。
试剂盒的组成
样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清先按20倍稀释(如在稀释板中加入190μL样品稀释液再加10μL血清,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
检验方法
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μL;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μL;样品孔每孔加入稀释后的样品100μL。
注:样本稀释比例相当于1:200。
4.混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。
5.甩去孔内液体,每孔加350μL工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,最后用干净的吸水纸拍干。
6.每孔加酶标记物100μL(空白孔除外)。盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液、显色液各50μL,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μL,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(OD值),无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)。
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